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凱氏定氮儀原理及應(yīng)用

新聞類別:技術(shù)信息   查看次數(shù):3319次  時間:2022/7/13 10:32:19

講凱氏定氮儀之前,我們先來認(rèn)識下蛋白質(zhì);蛋白質(zhì)是有機(jī)大分子,是生命活動的主要承擔(dān)者。沒有蛋白質(zhì)就沒有生命。

蛋白質(zhì)是由氨基酸以“脫水縮合”的方式組成的多肽鏈經(jīng)過盤曲折疊形成的具有一定空間結(jié)構(gòu)的物質(zhì)。

一個氨基酸分子的羧基(-COOH)和另一個氨基酸分子的氨基(-NH2)相連接,同時脫去一分子水,形成肽鍵(-NH-CO-),這種方式叫做脫水縮合反應(yīng)。

凱氏定氮儀的由來,丹麥化學(xué)家凱耶達(dá)爾(J. Kjeldahl)1883年提出的濕法定量測定含氮有機(jī)化合物中氮的方法。 

凱氏定氮法主要用來測定樣品中有機(jī)氮含量

有機(jī)物即有機(jī)化合物。含碳化合物(一氧化碳、二氧化碳、碳酸鹽、金屬碳化物等少數(shù)簡單含碳化合物除外)或碳?xì)浠衔锛捌溲苌锏目偡Q。有機(jī)物是生命產(chǎn)生的物質(zhì)基礎(chǔ)。

有機(jī)化合物除少數(shù)以外,一般都能燃燒。和無機(jī)物相比,它們的熱穩(wěn)定性比較差,電解質(zhì)受熱容易分解。有機(jī)物的熔點(diǎn)較低,一般不超過400℃。

凱氏定氮儀測量樣品蛋白質(zhì)含量主要經(jīng)過三個步驟;

第一步:消解  目的是將有機(jī)物中的胺根在高溫和催化劑CuSO4,濃H2SO4 作用下反應(yīng),生成(NH4)2SO4

反應(yīng)方程式:

    2NH2-+H2SO4+2H+=(NH4)2SO4

第二步 蒸餾  目的是將消解完成的樣品在凱氏定氮儀中與堿發(fā)生反應(yīng),通過蒸餾釋放出NH3 ;

反應(yīng)方程式:  

    (NH4)2SO4+2NaOH=2NH3+2H2O+Na2SO4

反應(yīng)完成后,用H3BO3 溶液收集蒸餾釋放出NH3,

反應(yīng)方程式:

    2NH3+4H3BO3=(NH4)2B4O7+5H2O

第三步 滴定    目的是將收集的NH3通過已知含量的標(biāo)準(zhǔn)酸滴定,反算出NH3的含量;

反應(yīng)方程式:

    (NH4)2B4O7+H2SO4+5H2O=(NH4)2SO4+4H3BO3

    (NH4)2B4O7+2HCl+5H2O=2NH4Cl+4H3BO3

單位注解:

 N:樣品中蛋白質(zhì)的百分含量;

V:樣品消耗硫酸或鹽酸標(biāo)準(zhǔn)液的體積,ml;

V空白:試劑空白消耗硫酸或鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積,ml

C:硫酸或鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的當(dāng)量濃度

M:稱量樣品的重量,g;

氮含量計算公式:

 

蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)換系數(shù):

1)一切蛋白質(zhì)都含N元素,且各種蛋白質(zhì)的含氮量很接近,平均為16%

2)蛋白質(zhì)系數(shù):任何生物樣品中每1gN的存在,就表示大約有1/16%=6.25g蛋白質(zhì)的存在, 6.25常稱為蛋白質(zhì)常數(shù)

凱氏定氮儀的原理大致就是以上所述;那么凱氏定氮儀適合在什么環(huán)境下工作呢?需要一個正規(guī)的化學(xué)實(shí)驗(yàn)室

1、電源電壓:AC 220V±10% 50Hz;

2、自來水壓力:0.02MPa-1MPa;

3、環(huán)境溫度:室溫——35℃;

了解更多詳細(xì)內(nèi)容,推薦參考定氮儀視頻教程。

凱氏定氮儀適用領(lǐng)域,使用過程中需要注意的細(xì)節(jié)以及日常的維護(hù)該怎么做?

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